細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)儀：細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法的注意事項(xiàng)

細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)儀制造商介紹細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法是利用鱟試劑來檢測(cè)或量化由革蘭陰性菌產(chǎn)生的細(xì)菌內(nèi)毒素，以判斷供試品中細(xì)菌內(nèi)毒素的限-量是否符合規(guī)定的一種方法。

　　1.醫(yī)療器械細(xì)菌內(nèi)毒素檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)

　　(1)GB/T 14233.2-2005 醫(yī)用輸液、輸血、注射器具檢驗(yàn)方法第2部分：生物學(xué)試驗(yàn)方法;

　　(2)2015年版《中國藥典》1143 細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法。

　　2.醫(yī)療器械細(xì)菌內(nèi)毒素所需主要設(shè)備

　　(1)電熱干燥箱，溫度達(dá)到 250 ℃，用于除外源性內(nèi)毒素。

　　(2)旋渦混合器。

　　(3)試管恒溫儀、恒溫水浴箱或適宜的恒溫器，可設(shè)定溫度為(37±1)℃。

　　(4)天平，精度為 0.1 mg 以下。

　　(5)鱟試劑，應(yīng)具有國家主管部門的批準(zhǔn)文號(hào)。

　　(6)細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)儀制造商表示細(xì)菌內(nèi)毒素國家標(biāo)準(zhǔn)品或細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品，應(yīng)具有國家主管部門的批準(zhǔn)文號(hào)。

　　(7)細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水應(yīng)符合滅菌注射用水標(biāo)準(zhǔn)，其內(nèi)毒素含量小于0.015EU/ml(用于凝膠法)或0.005 EU/ml(用于光度測(cè)定法)，且對(duì)內(nèi)毒素試驗(yàn)無干擾作用。

　　(8)實(shí)驗(yàn)用具：剪刀、砂輪、試管、三角瓶、試管架、洗耳球、封口膜、75% 乙醇棉、時(shí)鐘、移液管(或刻度吸管)、凝集管(10 mm×75 mm)、微量加樣器及無熱原吸頭。耐熱器皿須經(jīng)250℃干烤至少30min。若使用與微量加樣器配套的吸頭等塑料器具時(shí)，應(yīng)選用標(biāo)明無內(nèi)毒素并且對(duì)試驗(yàn)無干擾的器械。

　　3.細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)儀制造商介紹檢測(cè)的注意事項(xiàng)：

　　(1)試驗(yàn)前，須用肥皂洗手，用75%乙醇棉球消毒，試驗(yàn)操作應(yīng)在清潔環(huán)境中進(jìn)行，過程中應(yīng)防止內(nèi)毒素的污染。

　　(2)在使用洗耳球、移液管取樣時(shí)，應(yīng)注意不要將洗耳球中的氣體吹入溶液中，以防止氣體中的內(nèi)毒素進(jìn)入供試液。

　　(3)試驗(yàn)所用器具經(jīng)250℃干烤30min以上，要待烤箱溫度升至250℃后開始計(jì)時(shí)。在不打開金屬容器的情況下，可在2d內(nèi)使用;如果玻璃器皿用錫箔紙包裝，嘉峪檢測(cè)網(wǎng)建議在不打開包裝的情況下可在兩周內(nèi)使用，否則須再次干烤。

　　(4)細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)儀制造商表示開啟細(xì)菌內(nèi)毒素國家標(biāo)準(zhǔn)品或工作標(biāo)準(zhǔn)品、鱟試劑時(shí)，先輕彈瓶壁，使粉末落入瓶底，然后用砂輪在瓶頸上部輕輕劃痕，75%乙醇棉球擦拭后啟開，啟開過程中應(yīng)防止玻璃碎片落入瓶?jī)?nèi)。

　　(5)無菌醫(yī)療器械生產(chǎn)企業(yè)在生產(chǎn)過程中須嚴(yán)格控制產(chǎn)品初始污染菌，以免導(dǎo)致滅菌后產(chǎn)品細(xì)菌內(nèi)毒素指標(biāo)超過限值。

　　(6)對(duì)于非液態(tài)產(chǎn)品企業(yè)制定產(chǎn)品技術(shù)要求時(shí)，如按EU/ml規(guī)定細(xì)菌內(nèi)毒素限值在試驗(yàn)方法中則需明確產(chǎn)品的浸提液體積。

　　(7)按GB/T14233.2-2005醫(yī)用輸液、輸血、注射器具檢驗(yàn)方法：生物學(xué)試驗(yàn)方法進(jìn)行供試品細(xì)菌內(nèi)毒素檢驗(yàn)時(shí)，供試液應(yīng)在(37±1)℃恒溫箱中浸提不小于1h，供試液貯存應(yīng)不超過2h。

　　(8)溶解鱟試劑及混勻供試品和鱟試劑時(shí)，不要?jiǎng)×艺袷幈苊猱a(chǎn)生氣泡;試驗(yàn)過程中應(yīng)注意更換吸頭，以避免檢查用水的污染及溶液的交叉污染。

　　(9)由于凝集反應(yīng)是不可逆的，所以在反應(yīng)過程中及觀察結(jié)果時(shí)應(yīng)注意不要使試管受到振動(dòng)，以免使凝膠破碎產(chǎn)生假陰性結(jié)果。

　　(10)細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)儀制造商表示進(jìn)行干擾試驗(yàn)時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照系列和含內(nèi)毒素的供試品溶液系列應(yīng)同時(shí)進(jìn)行;如經(jīng)檢驗(yàn)證實(shí)供試品對(duì)細(xì)菌內(nèi)毒素試驗(yàn)有不能排除的干擾作用則不適宜采用凝膠限度法。

　　(11)在進(jìn)行鱟試劑靈敏度復(fù)核、干擾試驗(yàn)和供試品細(xì)菌內(nèi)毒素檢查時(shí)，各個(gè)試驗(yàn)中要求的對(duì)照應(yīng)同時(shí)進(jìn)行，并在試驗(yàn)有效的情況才能進(jìn)行計(jì)算和判斷。

　　(12)細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)儀制造商表示對(duì)于一個(gè)初包裝內(nèi)有多組件的成套器械，如規(guī)定的內(nèi)毒素限值是針對(duì)成套器械的，可以用一份浸提液對(duì)所有組件浸提，也可將各組件分別浸提后混合，各組件所用的浸提液總體積應(yīng)不超過MVD，當(dāng)組合后樣品出現(xiàn)結(jié)果不確定時(shí)，則需分別檢驗(yàn)各組件，以研究各組件的污染源。

　　(13)如一個(gè)初包裝產(chǎn)品為多個(gè)醫(yī)療產(chǎn)品的集合，在臨床應(yīng)用中每種醫(yī)療器械獨(dú)立使用，則應(yīng)有各自的產(chǎn)品內(nèi)毒素限值，且應(yīng)分別進(jìn)行試驗(yàn)和評(píng)價(jià)。

　　(14)2015年版《中國藥典》1143細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法包括凝膠法和光度測(cè)定法，后者包括濁度法和顯色基質(zhì)法。供試品檢測(cè)時(shí)，可使用其中任何一種方法進(jìn)行試驗(yàn)。當(dāng)測(cè)定結(jié)果有爭(zhēng)議時(shí)，除另有規(guī)定外，以凝膠限度試驗(yàn)結(jié)果為準(zhǔn)。