細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法國內(nèi)外發(fā)展簡(jiǎn)況

熱原系指一切可以引起人體及動(dòng)物發(fā)熱反應(yīng)的物質(zhì)。細(xì)菌內(nèi)毒素是一種與革蘭陰性菌細(xì)胞壁相關(guān)的熱原物質(zhì)，是至今發(fā)現(xiàn)在水溶液中普遍的熱原。藥品注射劑中的熱原檢查是藥品安全性的重要檢驗(yàn)項(xiàng)目之一，自1942年美國首先將家兔法作為藥品的熱原檢查之后，這項(xiàng)檢查對(duì)保障藥品的安全性方面發(fā)揮了重要作用。隨著制藥工業(yè)迅速發(fā)展、新藥品種的不斷增加，家兔法的的局限性日益突出（如放射性藥品、抗腫瘤藥物等藥物本身藥理作用干擾家兔升溫試驗(yàn)）。20世紀(jì)60年代創(chuàng)建了微量細(xì)菌內(nèi)毒素的鱟血細(xì)胞溶解物檢測(cè)法（簡(jiǎn)稱鱟試驗(yàn)法），并應(yīng)用于藥品和生物制品的熱原檢測(cè)。下面就細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法國內(nèi)外發(fā)展簡(jiǎn)況進(jìn)行闡述。

1、國外發(fā)展簡(jiǎn)況

1968年 Liven J.和 Bang F.建立了鱟試驗(yàn)法。1973年美國FDA制定了鱟試驗(yàn)準(zhǔn)則，闡明“鱟試劑是一種檢測(cè)細(xì)菌內(nèi)毒素的靈敏指示劑"。1980年美國FDA發(fā)布用鱟試劑檢查人用和獸用注射劑成品內(nèi)毒素的準(zhǔn)則。同年美國藥典20版收載了細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法，但在藥典各正文中未涉及。1984年美國藥典增補(bǔ)本中，修訂了該檢查法并規(guī)定了40種放射性藥品和5種注射用水用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法替代熱原檢查。美國藥典22版第五增補(bǔ)本規(guī)定185種藥品以細(xì)菌內(nèi)毒素檢查取代熱原檢查。美國藥典23版1至7增補(bǔ)本采用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法的品種已達(dá) 620余種，保留熱原檢查的品種僅約30種，同時(shí)除了經(jīng)典的凝膠外，還收載了動(dòng)態(tài)濁度法、動(dòng)態(tài)顯色法、終點(diǎn)顯色法。

歐洲藥典于1987年、英國藥典1989年增補(bǔ)本分別收載了細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法。1990年日本藥局方增補(bǔ)本也收載了這一方法。英國藥典1993年版及增補(bǔ)本（1994~1997）規(guī)定細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法的品種有40多種。

2、國內(nèi)發(fā)展簡(jiǎn)況

在我國，1975~1982年是鱟試劑的研究階段。1988年衛(wèi)生部頒布細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法，允許4種藥品使用細(xì)菌內(nèi)毒素法初試^[1]。1993年中國藥典1990年版第2增補(bǔ)本收載細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法，但在藥典各正文中涉及^[2]。1995年 Chp95二部附錄規(guī)定注射用水等5種藥品用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法取代熱原檢查。2000年 Chp2000二部規(guī)定細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法的品種有47種^[3]，并且增加了細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原則。2005年Chp2005二部規(guī)定細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法的品種有120種^[4]，同時(shí)檢查法中增加了定量測(cè)定法中的濁度法和顯色基質(zhì)法。

參考文獻(xiàn):

1.中華人民共和國衛(wèi)生部標(biāo)準(zhǔn)[S]WS1-228(Y-47) -88.

2.ChP(中國藥典)[M].1990.第二增補(bǔ)本,57.

3.ChP(中國藥典)[M]. 2000.Vol (二部):前言.

4.ChP(中國藥典)LM].2005 . Vol l(二部):前言.