關(guān)于鱟試驗法中假陽性結(jié)果的解決方法

樣品中混入細(xì)菌內(nèi)毒素發(fā)生凝集，由形成凝膠的有無來檢測樣品中的內(nèi)毒素，然而鱟試劑除了內(nèi)毒素反應(yīng)外，它同時也會對內(nèi)毒素以外的其他物質(zhì)存在凝集反應(yīng)。因此，勢必會形成假陽性或假陰性的實驗結(jié)果。這就是鱟試驗法中的特異性問題。

對于假陽性結(jié)果的問題，可以說十分復(fù)雜。因為對于大多數(shù)樣品來說，主要都為假陰性情況較多，而對于假陽性結(jié)果的判斷和排除是很困難的。當(dāng)我們對一個樣品用鱟試驗法檢測出陽性結(jié)果時，一可以說是由于內(nèi)毒素超過限值所引起，二也可以理解為假陽性結(jié)果。因此我們在實驗時要特別注意區(qū)分。

在假陽性結(jié)果的研究過程中，最-突出的是有關(guān)G因子反應(yīng)系被激活所形成的凝膠化反應(yīng)，即一般的鱟試劑由于含有G因子也可被（1,3）-β-D-glucan（葡聚糖）所激活而使產(chǎn)生凝集反應(yīng)，從而形成假陽性結(jié)果。

關(guān)于（1,3）-β-D-glucan：它是在1981年由Adinuma所發(fā)現(xiàn)一種抗癌藥，能使鱟試劑產(chǎn)生凝固。國外報道該物質(zhì)在10ng/ml時就可使鱟試劑凝固。根據(jù)我們的試驗發(fā)現(xiàn)不同廠家的鱟試劑可在2.5 ~10ng/ml范圍內(nèi)使鱟試劑凝固。該物質(zhì)廣泛存在于擔(dān)子菌、真菌、地衣類、酵母和藻類的菌體成分中。另外，某些用人造纖維造的人工腎透析膜上也含有類似物質(zhì)，但它可引起家兔升溫。

（1,3）-β-D-glucan對熱極為穩(wěn)定。高壓121℃并不能使其滅活。需250℃2小時加熱滅菌才能使其滅活。因此，要想防止假陽性結(jié)果的產(chǎn)生，就必須要排除（1,3）-β-D-glucan，使其不能激活G因子而形成凝膠。

國外在80年代后對此進(jìn)行了許多的研究和改進(jìn)。目前已開發(fā)出僅對內(nèi)毒素起反應(yīng)的專一鱟試劑。只與內(nèi)毒素起反應(yīng)的鱟試劑有：日本生化學(xué)工業(yè)株式會社生產(chǎn)的Endospecy，它是將東方鱟裂解液中各組分提取后重組，重組時不加G因子，另一種是日本和光純藥株式會社生產(chǎn)的ES =Ⅱ，它是美洲鱟裂解液中加入大刃羧甲基curdaln封閉G因子。同時國外也開發(fā)出只與（1,3）-β-D-glucan起反應(yīng)的鱟試劑：由蠶中提取而來的新型的SLP試劑。（和光）以及日本化學(xué)工業(yè)株式會社生產(chǎn)的Gluspecy。

對于大多數(shù)樣品來說，由于使用特異性鱟試劑與非特異性鱟試劑對其結(jié)果是沒有差異的。因此在一般情況下可以不必考慮，只有在確實認(rèn)定有干擾時，才考慮使用特異性鱟試劑以排除干擾。