CD14分子與脂多糖的結(jié)合域

人類CD14與脂多糖的結(jié)合域位于CD14N端的151個氨基酸上，因為含有該序列氨基酸修剪（truncation）的CD14足以引起完-全的生物學(xué)反應(yīng)，之后研究者進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，N端的65個氨基酸是CD14結(jié)合脂多糖及信號傳遞的關(guān)鍵區(qū)域。為了更精確定位CD14分子的結(jié)合位點，研究者采用基因突變等方法，使個別氨基酸的密碼子發(fā)生變異。

Stelter等在N端的152氨基酸區(qū)域內(nèi)用丙氨酸取代而獲得一系列的CD14突變體，23種突變體蛋白質(zhì)中有21種能穩(wěn)定地表達(dá)在轉(zhuǎn)染的CHO細(xì)胞表面，其中20種在血漿中對LBP以依賴性的方式結(jié)合脂多糖，只有一種突變體（Ala39-Ala41，Ala43，Ala44）CD14不能與脂多糖或大腸桿菌發(fā)生特異性的相互作用，也不能引發(fā)由脂多糖啟動的NF-eB的核移位，且這種突變體的CD14不與CD14單克隆抗體My4發(fā)生反應(yīng)?？?/span>CD14單克隆抗體My4具有廣泛的種屬間交叉反應(yīng)性，與人、牛、豬、兔及豚鼠的單核細(xì)胞的CD14均能反應(yīng)，說明My4只能夠識別CD14中非常保守的表位。

上述結(jié)果顯示，N端39~44殘基是人類CD14與脂多糖結(jié)合位點的最基本部分。Shapiro等在CD14分子的N端合成有5個氨基酸相互重疊，長度為15個氨基酸的多肽，其中包括含上述區(qū)域氨基酸的15肽能夠抑制脂多糖與sCD14的結(jié)合。